無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室主要用于生物化學(xué)、生物醫(yī)學(xué)、微生物學(xué)、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、基因重組以及生物制品等研究使用的實(shí)驗(yàn)室,統(tǒng)稱潔凈實(shí)驗(yàn)室。
1、組成:無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室由準(zhǔn)備室、洗滌室、滅菌室、無(wú)菌室、恒溫培養(yǎng)室和普通實(shí)驗(yàn)室六部分組成。這些房間的共同特點(diǎn)是要求地板和墻壁的質(zhì)地光滑堅(jiān)硬,儀器和設(shè)備的陳設(shè)簡(jiǎn)潔,便于打掃衛(wèi)生。
2、內(nèi)外間要求:無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有內(nèi)、外兩間,內(nèi)間是無(wú)菌室,外間是緩沖室。所有的房間面積不宜過大,吊頂不宜過高,要便于空氣滅菌。
3、安全要求:無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室、生物安全實(shí)驗(yàn)室必須保證人身安全、環(huán)境安全、廢棄物安全和樣本安全,能長(zhǎng)期而安全地運(yùn)行,同時(shí)還需要為實(shí)驗(yàn)室工作人員提供一個(gè)舒適而良好的工作環(huán)境。
一、無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室基本要求和配置條件分為以下幾點(diǎn):
1、準(zhǔn)備室用于配制培養(yǎng)基和樣品處理等(室內(nèi)設(shè)有試劑柜、存放器具或材料的專柜、電源、電爐、冰箱、實(shí)驗(yàn)臺(tái)和上下水道等)。
2、洗滌室用于洗刷器皿等(由于使用過的器皿已被微生物污染,有時(shí)還會(huì)存在病原微生物。因此,在條件允許的情況下,最好設(shè)置洗滌室。室內(nèi)應(yīng)備有加熱器、蒸鍋,洗刷器皿用的盆、桶等,還應(yīng)有各種瓶刷、肥皂、洗衣粉、去污粉等)。
3、滅菌室主要用于培養(yǎng)基的滅菌和各種器具的滅菌室內(nèi)應(yīng)備有烘箱、高壓蒸汽滅菌器等滅菌設(shè)備及設(shè)施。
4、無(wú)菌室是系統(tǒng)接種、純化菌種等無(wú)菌操作的專用實(shí)驗(yàn)室(無(wú)菌室也稱接種室,在微生物工作中,菌種的接種移植是一項(xiàng)主要操作,這項(xiàng)操作的特點(diǎn)就是要保證菌種純種,防止雜菌的污染。在一般環(huán)境的空氣中,由于存在許多塵埃和雜菌,很易造成污染,對(duì)接種工作干擾很大)。
二、無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室建設(shè)和裝修的主要組成部分為以下幾點(diǎn):
1、密閉良好的圍房構(gòu)建;2、易凈潔衛(wèi)生的地坪處理;3、優(yōu)質(zhì)的空氣調(diào)節(jié)與循環(huán)凈化過濾系統(tǒng);4、靈敏的潔凈檢測(cè)系統(tǒng)與控制系統(tǒng);5、設(shè)計(jì)合理的氣壓力隔離系統(tǒng)。
三、無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室整體結(jié)構(gòu):
1、無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的各項(xiàng)建筑物應(yīng)堅(jiān)固耐用、易于維修、易于清潔,并具備能防止食品、食品接觸面及內(nèi)包裝材料遭受污染(如有害動(dòng)物的侵入、棲息、繁殖等)的結(jié)構(gòu)。
2、為防止交叉污染,應(yīng)分別設(shè)置人員通道及物料運(yùn)輸通道,人員通道應(yīng)按潔凈室通道要求嚴(yán)格執(zhí)行,各通道應(yīng)裝有空氣幕(即風(fēng)幕)或雙向彈簧門及電子滅蠅(蚊)器等防蟲設(shè)施。
3、須將通向外界的管路、門窗和通風(fēng)道四周的空隙完全填充,所有窗戶、通風(fēng)口和風(fēng)機(jī)開口均應(yīng)裝上防護(hù)網(wǎng)。
4、無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室的高度應(yīng)能滿足工藝、衛(wèi)生要求,以及設(shè)備安裝、維護(hù)、保養(yǎng)的需要。
四、無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室的操作臺(tái):
無(wú)菌工作區(qū)最好用無(wú)菌操作臺(tái),或者用潔凈工作臺(tái)代替,需要放置在離門最遠(yuǎn)的地方。
五、無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室里的地面:
無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的地面應(yīng)使用無(wú)毒、防滑、不滲水、不吸水、無(wú)裂隙且易于清洗消毒的建筑材料鋪砌(如耐酸磚、水磨石、混凝土等),地面應(yīng)有適當(dāng)坡度(以1.0~1.5%為宜)。
六、無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室里的屋頂與天花板:
1、屋頂和天花板應(yīng)選用不吸水、表面光潔、無(wú)毒、防霉、耐腐蝕、易清潔的淺色材料覆涂。
2、食品及食品接觸面暴露的上方不應(yīng)設(shè)有蒸氣、水、電氣等輔助管道,以防止灰塵或冷凝水等落入。
七、無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室的墻壁與門窗:
1、無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室的墻壁應(yīng)采用無(wú)毒、不吸水、不滲水、防霉、平滑、易清洗的淺色材料構(gòu)筑,用此材料裝修高度應(yīng)直至屋頂。
2、所有門窗結(jié)構(gòu)應(yīng)采用防銹、防潮、易清洗的密封框架。
八、無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室里的采光、照明設(shè)施:
無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有充足的自然采光或人工照明,加工場(chǎng)所工作面的混合照度不應(yīng)低于300LUX,配料及灌裝車間不應(yīng)低于800LUX。
九、無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室里的空氣處理凈化設(shè)施:
1、無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室必須安裝有效的通風(fēng)設(shè)備,其空氣流向應(yīng)從清潔區(qū)域流向非清潔區(qū)域,采用機(jī)械通風(fēng)時(shí),換氣量應(yīng)大于3次/小時(shí)。
2、無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室溫度應(yīng)控制在15~27℃之間,濕度控制在50%以下為宜。
3、無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室入口處應(yīng)分別設(shè)有人員和物料的凈化設(shè)施。
十、無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室里的管理和消毒,內(nèi)部裝飾、消毒要求都很嚴(yán)格:
1、無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室應(yīng)每次使用前后用0.1%苯扎溴銨溶液或2%甲醛液擦拭工作臺(tái)面及可能污染的死角,濕拖地面,打開無(wú)菌空氣過濾器及超凈工作臺(tái)的開關(guān)30分鐘,紫外線殺菌燈照射1小時(shí)。
2、操作人員用肥皂洗手后進(jìn)入緩沖間換拖鞋,用75%酒精棉球擦手,穿戴工作衣帽、口罩。將所需物品剝?nèi)ヅFぜ埣巴獍b,從傳遞窗移入操作間,再用0.1%苯扎溴銨溶液泡手后進(jìn)入操作間,在酒精(或煤氣燈)火焰區(qū)(火焰高度3-5cm)操作。
3、操作者不得用嘴直接吸吹吸管,防止致病菌感染操作人員及口中的雜菌污染供試品。
4、供試品表面消毒,如為安瓿先用砂輪劃痕后用2%碘酒棉球擦拭,再用75%酒精棉球擦拭、待干,也可以用消毒液浸泡消毒。
5、注射器如需回抽時(shí),應(yīng)對(duì)著火焰吸入無(wú)菌空氣。
6、在無(wú)菌操作中切勿大幅度或快速動(dòng)作、拖行,以免攪動(dòng)空氣中塵埃微粒。
7、所用的器材如培養(yǎng)基、稀釋劑配制后經(jīng)121℃濕熱滅菌30分鐘,吸管培養(yǎng)皿等均應(yīng)洗滌,干燥,包扎后經(jīng)160℃干熱滅菌2小時(shí)才能使用。
8、無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室一般設(shè)置在微生物實(shí)驗(yàn)室內(nèi),室內(nèi)室外裝備的換氣設(shè)備必須有空氣過濾裝置。在獲得了無(wú)菌環(huán)境和無(wú)菌材料后,只有保持無(wú)菌狀態(tài),才能對(duì)某種特定的已知微生物進(jìn)行研究。所以控菌能力和控菌穩(wěn)定性是無(wú)菌室的核心驗(yàn)收指標(biāo)。業(yè)內(nèi)通行的驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)為100級(jí)潔凈區(qū)平板雜菌數(shù)平均不得超過1個(gè)菌落,10000級(jí)潔凈室平均不得超過3個(gè)菌落,在通行標(biāo)準(zhǔn)之外,還應(yīng)該定期保養(yǎng)與維護(hù)。只有建設(shè)時(shí)合理的選材指標(biāo),合適凈化等級(jí)和長(zhǎng)期管理與維護(hù),才能使無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室發(fā)揮其應(yīng)有的作用。